2026-08-11
Здравствуйте, сегодня я хочу поделиться с вами статьёй, опубликованной Китайской академией сельскохозяйственных наук в журнале «Veterinary Sciences» под названием «Генетические и биологические свойства эпидемического штамма вируса панлейкопении кошек (Ala91Ser) в Китае».
Фелиная панлейкопения (FPL), широко известная как «кошачий чума», представляет собой высококонтагиозное и смертельно опасное инфекционное заболевание, вызываемое вирусом фелиной панлейкопении (FPLV), которое по праву считается «главным убийцей» здоровья кошек. С 2017 года среди кошек в Китае быстро распространился штамм FPLV, несущий мутацию, при которой аминокислота аланин в 91-й позиции белка VP2 заменена на серинин (Ala91Ser), что привело к значительному росту заболеваемости и смертности; болезнь поражает даже некоторых иммунизированных кошек, что представляет огромную угрозу для отечественной индустрии домашних животных. Исследовательская группа Китайской академии сельскохозяйственных наук успешно выделила и идентифицировала циркулирующий в Китае штамм кошачьего чумы FPLV-CC19-02, а также провела систематический анализ его генетической эволюции, патогенности и иммуногенности, что послужило ключевой научной основой для самостоятельной разработки в Китае вакцины против кошачьего чумы и мер по профилактике и контролю эпидемии.
I. Кошачий чума и штамм с мутацией Ala91Ser: основная информация
Вирус панлейкопении кошек относится к роду Parvovirus семейства Parvoviridae; это бескапсульный одноцепочечный ДНК-вирус с геномом длиной около 5000 п.н., кодирующим неструктурные белки NS1/NS2 и структурные белки VP1/VP2. Белок VP2 является основным структурным компонентом вируса, определяет хостоспецифичность вируса и его способность связываться с рецепторами, а также является ключевым антигеном, индуцирующим выработку организмом защитных нейтрализующих антител.
Кошачий панлейкоцитоз может поражать всех представителей семейства кошачьих, а также распространяться на таких редких диких животных, как еноты, норки, гигантские панды и сибирские тигры. У заболевших кошек наблюдаются такие симптомы, как подавленное настроение, потеря аппетита, рвота, диарея, сильное обезвоживание, резкое снижение уровня лейкоцитов и серьезные повреждения слизистой оболочки кишечника; смертность среди невакцинированных котят может превышать 80 %.
С 2017 года мутантный штамм FPLV с заменой Ala91Ser внезапно возник в Китае и быстро распространился, став абсолютно доминирующим циркулирующим штаммом; доля этого мутантного штамма среди циркулирующих штаммов FPLV в Китае резко возросла с 10 % в 2017 году до 87 % в 2022–2023 годах; он не только бушует внутри страны, но и вызвал вспышки в таких странах Юго-Восточной Азии, как Вьетнам и Индия, демонстрируя тенденцию к региональным вспышкам; из-за значительных генетических различий с традиционными вакцинными штаммами эффективность имеющихся импортных вакцин ставится под сомнение, и часть привитых кошек по-прежнему заболевает. Штамм FPLV-CC19-02, выделенный в ходе данного исследования, является типичным представителем циркулирующего в Китае штамма Ala91Ser и ключевым штаммом для решения текущих проблем профилактики и контроля кошачьей чумы.
II. Основные методы исследования: полный цикл от выделения вируса до экспериментов на животных
Для всестороннего анализа биологических характеристик штамма FPLV-CC19-02 исследовательская группа создала четыре основные экспериментальные системы: выделение и идентификация вируса, анализ генетической эволюции, оценка патогенности и тестирование иммуногенности. Эксперименты были тщательно спланированы, а данные — подробны.
1. Образцы и экспериментальные материалы 1.1 Источник вируса: ветеринарная клиника для домашних животных в районе Чаоян города Чанчунь, провинция Цзилинь; мазки из фекалий, у которых с помощью ПЦР был подтвержден положительный результат на кошачий чуму; 1.2 Клеточная модель: клетки почек кошки (F81), использованные для выделения и размножения вируса; 1.3 Опытные животные: 19 британских короткошерстных кошек в возрасте 8–10 недель с титром антител к кошачьей чуме по методу ингибирования гемагглютинации (HI) < 1:8, что позволило исключить влияние материнских антител.
2. Выделение и идентификация вируса 2.1. Вирус выделяли с помощью стандартного метода пассажирования клеток; идентификация проводилась с помощью нескольких методов: наблюдения за клеточными поражениями, прямой иммунофлюоресценции, электронно-микроскопического исследования морфологии, гемагглютинационного теста и секвенирования гена VP2; 2.2. После 3 поколений последовательного слепого пассажирования вирус мог индуцировать типичные парвовирусные поражения на клетках F81; 2.3 Результаты иммунофлюоресцентного анализа были явно положительными; при электронно-микроскопическом исследовании были обнаружены сферические частицы парвовируса размером 20–25 нм; 2.4 Титр гемоглитинации достигал 1:1024, что свидетельствует о хорошей вирусной активности.
3. Генетический и эпидемиологический анализ 3.1 Амплификация полного гена VP2 вируса; на основе 770 полных последовательностей FPLV из базы данных NCBI проведено филогенетическое анализирование, сравнение мутационных сайтов и отслеживание глобальных тенденций распространения; 3.2 Определение генетического расстояния между штаммом FPLV-CC19-02 и штаммами коммерческих вакцин; 3.3 Проследить происхождение мутации Ala91Ser и пути её глобального распространения; 3.4 Определить годовую долю данного мутантного штамма в эпидемической картине Китая.
4. Эксперименты по патогенности у кошек: 9 восприимчивых кошек были разделены на группу заражения (6 кошек) и контрольную группу (3 кошки); кошкам из группы заражения был введён штамм FPLV-CC19-02 перорально, после чего проводилось непрерывное наблюдение в течение 10 дней: ежедневно контролировали температуру тела, общее состояние, аппетит, рвоту, кал и другие клинические симптомы; определяли количество лейкоцитов в периферической крови и выделение вируса с калом; проводили вскрытие погибших кошек и определяли распределение вируса в селезенке, почках, брыжеечных лимфатических узлах, кишечнике и других тканях.
5. Оценка иммуногенности. 10 восприимчивых кошек разделили на две группы и вакцинировали соответственно самостоятельно разработанной инактивированной вакциной (штамм FPLV-CC19-02) и импортной коммерческой вакциной (Fel-O-Vax® PCT). На 0, 7, 14 и 21-й день после иммунизации определяли уровень HI-антител в сыворотке крови для оценки способности вакцин индуцировать иммунный ответ.
III. Основные результаты исследования: три ключевые характеристики штамма с мутацией Ala91Ser
1. Генетические характеристики: Высокая дифференциация по сравнению с существующими вакцинными штаммами; ключевые мутации четко определяют филогенетические отношения. Штамм FPLV-CC19-02 (номер регистрации в GenBank: OP471917.1) наиболее близок по родству к циркулирующим штаммам в китайских провинциях Шанхай, Хэнань и Чжэцзян, образуя отдельную ветвь; он имеет чрезвычайно большое генетическое расстояние от всех коммерческих вакцинных штаммов, используемых во всем мире (Pfizer, Merck, Vick, Merial и др.), и относится к другой эволюционной ветви. Что касается ключевых мутаций, по сравнению с прототипным штаммом кошачьей чумы Cu-4 (основный штамм, разрешенный к импорту в Китай), в белке VP2 штамма FPLV-CC19-02 присутствуют две ключевые аминокислотные мутации. 91-я позиция: аланиновый остаток → сериновый остаток (Ala91Ser, характерная мутация); 91-я позиция: изолейцин → треонин (Ile101Thr); кроме того, имеются второстепенные мутации в 232-й и 562-й позициях, которые изменяют конформацию кольцевой области белка VP2, влияя на способность вируса связываться с рецепторами и на его антигенность, что и является основной причиной снижения защитной эффективности существующих вакцин.
Согласно данным глобального эпидемиологического исследования, мутация Ala91Ser впервые была обнаружена в 2004 году в вирусе FPLV, выделенном из тигров в Китае; в 2006–2007 годах были зарегистрированы единичные случаи в Италии, Венгрии и Южной Корее, а после 2008 года — единичные случаи в Бразилии; в 2017 году в Китае произошла новая вспышка без явных причин, после чего эта мутация быстро стала доминирующей; с 2023 года она широко распространилась во Вьетнаме, став региональной угрозой для Юго-Восточной Азии.
2. Патогенность: чрезвычайно высокая вирулентность, заболеваемость 100 %, летальность 83 %
Штамм FPLV-CC19-02 демонстрирует гораздо более высокую патогенность, чем обычные штаммы, и является типичным высокопатогенным эпидемическим штаммом: через 4 дня после заражения у кошек появляются типичные симптомы кошачьего чумы: апатия, потеря аппетита, рвота, диарея, кровь в кале, высокая температура (до 41,5 °C); по мере прогрессирования заболевания наблюдаются сильное обезвоживание и резкое снижение массы тела, что соответствует проявлениям тяжелой формы кошачьего чумы. Резкое снижение уровня лейкоцитов: на 3-й день после заражения у больных кошек началось устойчивое снижение уровня лейкоцитов в периферической крови; у части кошек этот показатель опустился ниже 5×10⁹/л, а перед смертью достиг минимума в 0,63×10⁹/л (что значительно ниже нормального диапазона 5,5–19,5×10⁹/л), что соответствует основному признаку «панейтропении».
Смертность чрезвычайно высока: в группе заражения заболели все 6 кошек (100 % заболеваемость), 5 из них погибли в течение 5–11 дней после заражения, смертность составила 83 %; в контрольной группе не наблюдалось никаких симптомов и летальных исходов, разница была крайне значимой. Тканевая тропность вируса четко определена: вирус преимущественно колонизирует кишечник и брыжеечные лимфатические узлы, вирусная нагрузка чрезвычайно высока; в селезенке и почках вирусная нагрузка была ниже, что также объясняет, почему основными патологическими признаками кошачьего чумы являются тяжелые кишечные кровотечения и повреждения. Характер выделения вируса с фекалиями четко прослеживается: выделение вируса с фекалиями начинается на 3-й день после заражения, а через 4 дня доля кошек, выделяющих вирус, достигает 83 % (5 из 6), что делает их важным источником заражения и свидетельствует о чрезвычайно высокой инфекционной способности данного штамма.
3. Иммуногенность: адаптирована к циркулирующим в Китае штаммам, превосходит импортные вакцины. Исследовательская группа подготовила инактивированную вакцину на основе штамма FPLV-CC19-02 и провела сравнение с импортной коммерческой вакциной, занимающей почти 100 % рынка Китая. Результаты оказались обнадеживающими: выработка антител происходила быстрее — уже через 7 дней после вакцинации у 2 из 5 кошек в группе, получившей вакцину собственной разработки, были обнаружены HI-антитела; в группе, получившей импортную вакцину, выработка антител задерживалась. Более высокий уровень антител: через 14 и 21 день после иммунизации титр антител HI у кошек из группы, получившей вакцину собственной разработки, был значительно выше, чем в группе, получившей импортную вакцину; индуцированный иммунный ответ был более сильным и эффективным. Хорошая безопасность: после введения инактивированной вакцины побочных реакций не наблюдалось; безопасность соответствует стандартам для ветеринарных вакцин, что свидетельствует о потенциале для коммерческого развития.
Эти результаты прямо доказывают: вакцина, приготовленная на основе распространенного в Китае штамма Ala91Ser, обладает более высокой иммуногенностью по сравнению с существующими импортными вакцинами, лучше соответствует текущей эпидемической ситуации в стране и является идеальным кандидатом для создания отечественной вакцины против кошачьего чумы.
IV. Глубокий анализ отрасли: почему это исследование имеет решающее значение? 1. Решение «узких мест» в текущей профилактике и борьбе с кошачьим чумой. В настоящее время рынок вакцин против кошачьей чумы в Китае практически полностью монополизирован импортными продуктами, при этом все импортные вакцины разработаны на основе традиционных зарубежных штаммов, которые имеют значительные генетические различия и антигенную несовместимость с доминирующим в Китае штаммом Ala91Ser, что приводит к частым случаям неэффективности иммунизации. Штамм FPLV-CC19-02, выделенный в ходе данного исследования, является представительным штаммом высокой вирулентности, циркулирующим на территории Китая. Разработка вакцины на его основе позволит обеспечить точное соответствие «циркулирующий штамм → вакцинный штамм», что из коренной причины повысит эффективность иммунной защиты.
2. Выявление основных закономерностей мутаций, лежащих в основе эпидемии кошачьего чумы в Китае. Исследования подтвердили, что мутация Ala91Ser является характерной молекулярной особенностью вируса кошачьего чумы в Китае; эта мутация не только усиливает вирулентность вируса, но и изменяет его антигенность, что является ключевым фактором обострения эпидемии и неэффективности иммунизации. Это предоставляет четкие ориентиры для молекулярной диагностики кошачьего чумы, типирования штаммов и мониторинга эпидемической ситуации в Китае.
3. Восполнение пробела в разработке отечественных вакцин против кошачьего чумы. Отрасль вакцин для домашних животных в Китае долгое время зависела от импорта, а кошачья чума, являясь самым распространённым инфекционным заболеванием кошек, требует наличия самостоятельных и контролируемых вакцин. В рамках данного исследования были выполнены основные доклинические исследования по разработке отечественной вакцины — от выделения вируса и анализа его характеристик до подтверждения иммуногенности, что заложило прочную основу для последующей промышленной реализации вакцины.
4. Сигнал о новых тенденциях в глобальной профилактике и борьбе с кошачьим чумой. Мутантный штамм Ala91Ser распространился из Китая в Юго-Восточную Азию, став регионально распространенным штаммом, что свидетельствует о продолжающейся эволюции вируса кошачьей чумы. Необходимо усилить глобальный мониторинг вируса и межрегиональное сотрудничество в области профилактики и борьбы с ним, чтобы предотвратить дальнейшее распространение мутантных штаммов. V. Выводы исследования и перспективы. В ходе данного исследования удалось успешно выделить FPLV-CC19-02 — представительный штамм вируса кошачьей чумы Ala91Ser, циркулирующий в Китае, и подтвердить наличие у этого штамма трех основных характеристик. Генетически: он сильно дифференцирован от существующих коммерческих вакцинных штаммов и несет ключевые мутации Ala91Ser и Ile101Thr; с точки зрения патогенности: обладает чрезвычайно высокой вирулентностью для кошек, вызывая заболевание у 100 % зараженных и приводя к летальному исходу в 83 % случаев, при этом наносит ущерб в основном кишечнику и иммунной системе; с точки зрения практического применения: инактивированная вакцина, приготовленная на основе этого штамма, обладает более высокой иммуногенностью по сравнению с импортными вакцинами и является идеальным кандидатом для создания отечественной вакцины против кошачьего чумы.
Результаты исследования не только восполнили пробел в фундаментальных исследованиях мутантных штаммов кошачьего чумы в Китае, но и обеспечили научную основу для профилактики и контроля заболевания, разработки вакцин, а также клинической диагностики и лечения. В будущем, с появлением на рынке отечественных вакцин, разработанных на основе местных эпидемических штаммов, профилактика и борьба с кошачьим чумой в Китае вступят в новый этап «точного иммунизирования и самостоятельного контроля», что позволит защитить здоровье миллиардов кошек у самого источника. В то же время это исследование напоминает нам: вирусы домашних животных постоянно эволюционируют, и только благодаря триединству постоянного мониторинга, фундаментальных исследований и промышленного внедрения результатов можно укрепить линию обороны в борьбе с инфекционными заболеваниями домашних животных и способствовать здоровому и устойчивому развитию индустрии домашних животных в Китае.
