2026-09-03
Резюме: Комбинированная внутрикожная вакцинация против ключевых заболеваний свиней обладает рядом преимуществ, включая экономию времени и трудозатрат, а также улучшение благополучия животных за счет сокращения количества инъекций и манипуляций. В данном исследовании изучалась эффективность недавно разработанной комбинированной внутрикожной вакцины против циркулярного вируса свиней типа 2 (PCV2) и микоплазмы пневмонии свиней (M. hyo) (вакцина PCV M Hyo ID) у свиней. Была оценена защитная эффективность данной вакцины против инфекций PCV2 и M. hyo, а также ее совместное применение с вакциной против внутриклеточного лаузена (LI) и одновременное, но не смешанное, применение с вакциной против вируса репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRSV). Результаты показали, что комбинированная вакцина PCV M Hyo ID эффективно предотвращает инфекции PCV2 и M. hyo. Кроме того, эта новая комбинированная вакцина PCV M Hyo ID после смешивания с вакциной LI ID может вводиться одновременно с вакциной PRRS ID в одну и ту же анатомическую область, что обеспечивает эффективную защиту свиней от этих четырёх основных заболеваний. Эффективность защиты при комбинированном применении этих вакцин сопоставима с эффективностью при отдельном применении каждой из них. Ключевые слова: вакцина Porcilis® PCV M Hyo ID, внутриклеточный бактерии M. hyo, синдром репродуктивных и респираторных расстройств свиней, комбинированная вакцина, вакцина для свиней, внутрикожная вакцинация
01. Введение
Свиной циркулярный вирус 2-го типа (PCV2), свиной микоплазменный пневмококк (M. hyo), вирус репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRSV) и внутриклеточный лаусен (LI) являются четырьмя основными высокопатогенными возбудителями в современном свиноводстве, представляющими серьезную угрозу для здоровья свиней, благополучия животных и экономической эффективности [1, 2, 3, 4].
PCV2 — это широко распространенный среди свиней одноцепочечный ДНК-вирус, который может вызывать целый ряд связанных с ним синдромов, объединенных под общим названием «циркулярная вирусная болезнь свиней» [5, 6], и является основным возбудителем системных заболеваний, вызванных PCV2. Инфекция PCV2 приводит к лимфоцитопении у свиней и сопутствующему гранулематозному воспалению лимфатических тканей, что, в свою очередь, ослабляет иммунную функцию и делает животных более уязвимыми к вторичным инфекциям.
Микоплазма свиной пневмонии — это бактериальный патоген, лишенный клеточной стенки, который прикрепляется к ресничевому эпителию трахеи, бронхов и альвеолярных бронхов, что приводит к нарушению работы системы очистки слизистой оболочки [7]. Кроме того, он подавляет иммунную функцию, повышая восприимчивость свиней к другим респираторным инфекциям [8]. Данный патоген является основной причиной эндемической пневмонии свиней (хронического респираторного заболевания свиней), а также одним из главных факторов, вызывающих синдром респираторных заболеваний свиней [9]. Инфекция, вызываемая Mycoplasma hyopneumoniae, широко распространена в регионах свиноводства, что приводит к увеличению затрат на лекарственные препараты и снижению продуктивности стад, нанося серьезный экономический ущерб [10].
PRRSV — это одноцепочечный РНК-вирус с положительной полярностью, вызывающий нарушения репродуктивной функции у свиноматок и респираторные заболевания у свиней всех возрастов [11, 12]. Вирус был впервые обнаружен в Северной Америке в 1987 году [13], а затем в 1990 году появился в Европе [14]. В соответствии с классификацией PRRSV подразделяется на два вида: вирус свиного репродуктивно-респираторного синдрома типа 1 (ранее известный как PRRSV-1 или европейский тип) и вирус свиного репродуктивно-респираторного синдрома типа 2 (ранее известный как PRRSV-2 или североамериканский тип) [15]. PCV2, микоплазма пневмонии свиней и PRRSV являются патогенами, имеющими наибольшее клиническое значение в синдроме респираторных заболеваний свиней. Данный синдром представляет собой сложное заболевание, обусловленное множеством факторов, основными признаками которого являются респираторные симптомы и задержка роста у свиней на откорме [16, 17].
Laxmannia intracellulare — облигатный внутриклеточный паразит, являющийся возбудителем гиперпластической кишечной болезни свиней. Заболевание проявляется гиперплазией клеток крипт толстой и подвздошной кишки, что в свою очередь вызывает разнообразные клинические симптомы. Пролиферативная кишечная болезнь свиней имеет две основные клинические формы: острую пролиферативную геморрагическую кишечную болезнь и хроническую аденоматозную болезнь кишечника свиней [18]. Острая форма может приводить к геморрагической диарее и внезапной гибели, поражая в основном молодых свиней в возрасте от 4 до 12 месяцев; хроническая форма, в свою очередь, характеризуется диареей или субклинической инфекцией, что приводит к снижению массы тела и потере производственных показателей, и особенно часто встречается в стадах свиней в возрасте от 6 до 20 недель [19].
Практика показывает, что вакцинация в сочетании с надлежащим управлением свиноводческим хозяйством позволяет эффективно предотвращать или контролировать заболевания на свинофермах, вызываемые PCV2, микоплазмой пневмонии свиней, PRRSV и внутриклеточным бактерией Лоусона. Однако, поскольку в настоящее время не существует единой комбинированной вакцины, способной одновременно эффективно противостоять вышеуказанным четырём основным патогенам, животноводы обычно вынуждены прибегать к следующим схемам: использование отдельных моновакцин, бивакцины против PCV2 и свиной микоплазмы пневмонии или вакцин, которые можно временно смешивать при вакцинации [20].
В целях повышения благополучия животных, уменьшения боли и стрессовых реакций, вызванных многократными прививками, снижения совокупных затрат, а также предотвращения рисков, таких как уколы иглой персонала, распространение нозокомиальных инфекций и попадание обломков игл в мясную продукцию, многие специалисты и животноводческие хозяйства отдают предпочтение использованию однодозовых комбинированных вакцин против основных патогенов и проводят вакцинацию с помощью безыгольных инъекционных устройств. Однако разработка такой комбинированной вакцины, которая одновременно отвечала бы всем требованиям безопасности, эффективности, срока годности и стоимости, по-прежнему представляет собой сложную задачу.
В рамках предварительных исследований наши недавние работы подтвердили, что четыре вида подкожных вакцин — вакцина против циркулярного вируса свиней (Porcilis PCV ID), вакцина против микоплазмы пневмонии свиней для однократной вакцинации (Porcilis M Hyo ID ONCE), вакцина против Lawsonia intracellulare (Porcilis Lawsonia ID) и вакцина против репродуктивно-респираторного синдрома свиней (Porcilis PRRS ID) — могут вводиться одновременно в одну и ту же анатомическую область с помощью безыгольных инъекционных устройств. Эта процедура выполнялась с использованием устройства с двумя соплами IDAL® 3G Twin (данное устройство позволяет одновременно вводить вакцины, расфасованные в два отдельных флакона; компания Henke-Sass Wolf, Германия) и устройства с одним соплом IDAL® 3G Mono (компания Henke-Sass Wolf, Германия) (Horsington и др., [21]).
В частности: вакцина PCV ID представляет собой готовый к применению препарат, основным компонентом которого являются вирусоподобные частицы PCV2, а также содержит адъювант X-Solve12 [22]. Вакцина M Hyo ID ONCE содержит инактивированные целые бактериальные клетки микоплазмы пневмонии свиней в сочетании с адъювантом X-Solve50 [23]. Вакцина Lawsonia ID представляет собой лиофилизированную инактивированную вакцину против внутриклеточной лаусонии; перед использованием её необходимо растворить с помощью адъюванта X-Solve12 или вакцины PCV ID [21, 24]. Вакцина PRRSV представляет собой аттенуированную живую вакцину против PRRSV1 в лиофилизированной форме; перед использованием её необходимо растворить с помощью адъюванта Diluvac Forte; вакцинация может проводиться внутрикожно или внутримышечно [25].
В данном исследовании мы представляем недавно разработанную готовую к применению комбинированную вакцину — Porcilis® PCV M Hyo ID. Эта вакцина содержит инактивированные антигены PCV2 и микоплазмы пневмонии свиней и предназначена для внутрикожной инъекции. Вакцина призвана повысить удобство использования, снизить затраты на вакцинацию и сократить количество инъекций, вводимых поросятам. Кроме того, за счёт сокращения объёма медицинских отходов, снижения затрат на упаковку, а также экономии энергии и средств, связанных с транспортировкой и хранением, данная вакцина также направлена на уменьшение углеродного следа на протяжении всего жизненного цикла.
Основная цель данного исследования заключалась в оценке защитной эффективности недавно разработанной комбинированной вакцины PCV M Hyo ID против инфекций, вызываемых PCV2 и микоплазмой пневмонии свиней. Вторичной целью является оценка возможности смешивания этой новой комбинированной вакцины с вакциной Lawsonia ID и одновременного введения с подкожной вакциной PRRS ID на одной стороне шеи в одно и то же время, что позволит обеспечить стаду комплексную защиту от вышеуказанных четырёх основных болезней свиней за счёт одной процедуры. Эффективность вакцины была подтверждена в ходе иммунологических испытаний с заражением каждым из патогенов.
02 Материалы и методы
2.1 Животные. В каждом исследовании использовались поросята обоих полов возрастом около 3 недель из нескольких пометов. Все поросята прошли вакцинацию до отлучения от свиноматки.
2.2 Вакцины. В данном исследовании оценивались вакцины PCV M Hyo ID, PRRS и Lawsonia ID. Все вакцины вводились внутрикожно с помощью безыгольных шприцев IDAL® 3G Mono или Twin. IDAL Twin — это устройство для внутрикожного введения с двумя наконечниками, расстояние между которыми составляет 3 см; оно позволяет за один раз одновременно вводить две вакцины, объем введения каждой из которых составляет 0,2 мл. За исключением вакцины против PRRS, все остальные вакцины вводились отдельно или в комбинации в дозах, рекомендованных производителем. Что касается вакцины против PRRS, то в исследованиях с заражением вирусом PRRSV доза вакцинации составляла 1 × 10⁴ TCID₅₀, а в других исследованиях — 1 × 10⁶ TCID₅₀. Лиофилизированная вакцина против PRRS восстанавливалась с использованием адъюванта Diluvac Forte; лиофилизированная вакцина против Lawsonia ID восстанавливалась с использованием адъюванта вакцины PCV M Hyo ID или X-Solve12.
2.3 Дизайн исследования PCV2 и отбор проб для анализа Выбрали гибридных поросят породы Чанбай × Дабай, у которых результат теста на ДНК PCV2 в крови был отрицательным, а титр материнских антител к PCV2 был ниже 6 log2 [26], и разделили их на три группы по 15 голов в каждой. Примерно в возрасте трех недель поросята первой группы (PCV-G1) были подвергнуты внутрикожной вакцинации с использованием устройства IDAL® 3G Twin по следующей схеме: смесь вакцин PCV M Hyo ID и Lawsonia ID вводилась одновременно с вакциной против PRRS в одну и ту же сторону шеи. Вторая группа (PCV-G2) получила только вакцину PCV M Hyo ID. Третья группа (PCV-G3) не подвергалась никакой иммунизации и выступала в качестве контрольной группы для испытания с введением вируса.
Через две недели после иммунизации (в возрасте 5 недель у поросят, на 14-й день исследования) всем поросятам была проведена инфицирующая проба штаммом PCV2b дикого типа I-12/11 (изолированным с голландской свинофермы). Инфицирование осуществлялось интраназально, общая доза составляла 5,8 log10 TCID50, общий объем — 6 мл (по 3 мл в каждую ноздрю). В течение всего периода исследования ежедневно проводилось наблюдение за клиническими проявлениями у поросят, а также осуществлялся сбор образцов крови и мазков из кала. Через три недели после заражения все животные были усыплены посредством электрошока (> 250 В, > 1,3 А) с последующим кровопусканием. При вскрытии были взяты образцы паховых и брыжеечных лимфатических узлов, миндалин и легочной ткани для анализа на наличие нуклеиновых кислот PCV2.
Образцы сыворотки после центрифугирования замораживали при температуре -20 °C для последующего анализа. В соответствии с методом, описанным в предыдущем исследовании [26], для определения уровня антител к PCV2 в сыворотке использовался иммуноферментный анализ.
Для экстракции ДНК из сыворотки, ректальных мазков и тканевых гомогенатов использовали коммерческий набор (Roche, Magnapure 96 with DNA/viral NA SV kit), после чего проводили количественное определение ДНК PCV2 с помощью специально разработанного метода qPCR. В реакции qPCR использовали специфические праймеры и двойной гидролизующий зонд, разработанные для PCV2-ORF2. Последовательности использованных праймеров:
F1: 5’- GTA ACG GGA GTG GTA GGA GAA -3’F2: 5’- GTA GCG GGA GTG GTA GGA GAA -3’R1: 5’- GCC ACA GCC CTA ACC TAT GAC -3’R2: 5’- GCC ACA GCC CTC ACC TAT GAC -3’Последовательность зонда: 5’- 6FAM- ATG TAA ACT ACT CCT CCC GCC ATA CCA TA -BHQ1-3’
Число циклов амплификации сравнивали со стандартом, содержащим плазмиду PCV2-ORF2 с известной концентрацией, а окончательные результаты выражали в виде log10 копий на микролитр экстракта ДНК. Образцы с показателями ниже 1,00 log10 копий/мкл считались отрицательными и при расчетах принимались равными 0,00 log10 копий/мкл.
В возрасте примерно трех недель (0-й день исследования) схема вакцинации поросят группы PRRS-G1 полностью соответствовала схеме, описанной выше для группы PCV-G1. Поросята группы PRRS-G2 получали только вакцину против PRRS. Поросята группы PRRS-G3 не вакцинировались и выступали в качестве контрольной группы при заражении вирусом. Через четыре недели после иммунизации (в возрасте 7 недель у поросят, 28-й день исследования) всем поросятам проводили заражение диким штаммом PRRSV типа 1 высокой вирулентности (штамм № 2, выделенный с голландской свинофермы). Заражение осуществляли интраназально, общая доза составляла 5,3 log10 TCID50, общий объем — 2 мл (по 1 мл в каждую ноздрю). В течение всего периода исследования ежедневно наблюдали за клиническими проявлениями у поросят и ежедневно регистрировали ректальную температуру, начиная за день до заражения и в течение 14 дней после заражения (с 27-го по 42-й день исследования). На 27-й и 56-й день исследования (по завершении исследования) проводили взвешивание, рассчитывали среднесуточный прирост массы тела каждого поросенка и проводили статистический анализ по группам. На 0-й, 27-й и 56-й дни исследования брали образцы крови; после отделения сыворотки их хранили при температуре -20 °C до проведения анализа. Для определения антител к PRRSV использовали набор для ИФА (IDEXX PRRS X3) в соответствии с инструкциями производителя; в данном наборе положительным считалось соотношение S/P ≥ 0,4. Содержание вируса PRRSV в сыворотке количественно определяли с помощью титрации на альвеолярных макрофагах свиней: исследуемые образцы подвергали 10-кратному серийному разведению (по 6 повторных лунок на каждую степень разведения), инокулировали в клетки PAM и культивировали при 37 °C; через 6–7 дней наблюдали за эффектом клеточной лезии. Вирусный титр рассчитывали по методу Спирмена-Кярбера, результаты выражали в виде log10 TCID50/мл. На 56-й день исследования всех животных усыпили посредством электрошока (> 250 В, > 1,3 А) с последующим кровопусканием.
2.4 Дизайн исследования и анализ образцов по Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyo) Были отобраны гибридные поросята породы Чанбай × Дабай, у которых титры антител к Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyo), PRRSV и Lawsonia intracellulare (LI) были отрицательными, а титр антител к PCV2 — ниже 6 log2. Подходящие поросята были разделены на 2 экспериментальные группы по 20 голов в каждой. В возрасте около трёх недель поросятам группы M hyo-G1 провели внутрикожную вакцинацию с помощью устройства IDAL 3G Twin. Схема вакцинации была следующей: смесь вакцин PCV M Hyo ID и Lawsonia ID вводили одновременно с вакциной против PRRS (без смешивания) на одной стороне шеи. Поросятам группы M hyo-G2 вводили только вакцину против PRRS в качестве контрольной группы для заражения.
Через четыре недели после иммунизации (в возрасте 7 недель) всем животным проводили заражение высокопатогенным диким штаммом датского микоплазмы пневмонии свиней. Заражение осуществляли интратрахеальным путем в течение двух дней подряд, ежедневно вводя 10 мл чистой культуры (доза заражения в первый день составляла 10⁹ единиц изменения цвета/мл, во второй день — 10⁸ единиц изменения цвета/мл). Образцы крови отбирали до иммунизации, до заражения и во время вскрытия. Анализ антител в сыворотке проводили в соответствии с инструкцией производителя с использованием наборов для определения антител к микоплазме пневмонии свиней IDEXX® и набора для определения антител к PRRS X3 IDEXX®. Через три недели после заражения все животные были усыплены посредством электрошока (> 250 В, > 1,3 А) с последующим кровопусканием, после чего было проведено исследование легочных поражений. Оценка легочных поражений проводилась в строгом соответствии со стандартом 2448 Европейской фармакопеи.
2.5 Дизайн исследования и анализ образцов по внутриклеточной лаусонии (Lawsonia). Использовались гибридные поросята породы Дюрок × Йоркшир, у которых уровень материнских антител к внутриклеточной лаусонии (LI) был отрицательным или низким (
Вес измеряли за день до заражения, а также на 6-й, 13-й и 20-й дни после заражения; рассчитывали среднесуточный прирост веса на каждое животное и проводили статистический анализ по группам.
Через три недели после заражения (49-й день исследования) всех свиней усыпили путем кровопускания после электрошоковой анестезии (> 250 В, > 1,3 А) и провели вскрытие. При вскрытии особое внимание уделяли кишечнику, в частности толстой кишке (т. е. участку тонкой кишки длиной 50 см), на наличие патологических изменений, указывающих на PPE. У каждого животного были взяты образцы кала (из прямой кишки) и образцы слизистой оболочки подвздошной кишки (на расстоянии 5 см выше соединения подвздошной кишки с слепой кишкой) для проведения специфического qPCR-анализа на LI. Кроме того, были взяты образцы ткани подвздошной кишки, которые фиксировали в 4%-ном буферном формалине, заливали в парафин и изготавливали срезы; затем проводили окрашивание гематоксилином и эозином (HE) и иммуногистохимическое (ИГХ) окрашивание с использованием моноклональных антител против LI, после чего проводили микроскопическое исследование.
Повреждения слизистой оболочки подвздошной кишки сначала оценивались визуально в соответствии с методами предыдущих исследований [24], а процент поражения подвздошной кишки рассчитывался по следующей формуле: процент поражения подвздошной кишки = (длина поражённого участка подвздошной кишки / общая длина подвздошной кишки) × 100. Общий балл поражения подвздошной кишки рассчитывался как произведение оценки слизистой оболочки подвздошной кишки и процента поражения подвздошной кишки; в итоге подсчитывался средний общий балл поражения подвздошной кишки в каждой группе лечения.
Гистологическая оценка (оценка по HE и оценка по IHC) проводилась в соответствии с методами, описанными в предыдущих исследованиях [24]. Общий гистологический балл представляет собой произведение оценки по HE и оценки по IHC; в итоге рассчитывался средний общий гистологический балл для каждой группы.
На 0, 28 и 49-й день исследования были взяты образцы крови, из которых выделяли сыворотку, которую хранили при температуре -20 °C до проведения анализа. Анализ сывороточных образцов проводили с помощью метода ELISA на антитела к внутриклеточным лаусониям, описанного в предыдущих исследованиях [24]. ДНК из 0,2 г образцов кала или слизистой оболочки выделяли с помощью коммерческого набора (Roche, Magnapure 96 with DNA/viral NA SV kit), а количественный анализ ДНК внутриклеточных лаусоний проводили с помощью метода qPCR, разработанного в предыдущих исследованиях [24].
2.6 Статистический анализ Анализ данных проводился с использованием статистического программного обеспечения SAS (SAS Institute Inc., Кэри, Северная Каролина, США) следующим образом: все проверки гипотез проводились с использованием двусторонних тестов, уровень значимости устанавливался на α = 0,05.
2.6.1 Анализ данных по PCV2 Анализ титра антител: для анализа титра антител к PCV2 на момент иммунизации использовался дисперсионный анализ. С использованием титра антител на момент иммунизации в качестве ковариаты проводился анализ ковариационного анализа титра антител к PCV2 на момент заражения. Для анализа титра антител к PCV2 после заражения использовался дисперсионный анализ с повторными измерениями.
Анализ вирусной нагрузки: для определения вирусной нагрузки в сыворотке и ректальных мазках площадь под кривой, полученная по результатам qPCR после заражения, рассчитывалась по трапециевидному правилу, а анализ проводился с помощью критерия Краскала-Уоллиса. Результаты qPCR для различных лимфатических тканей/органов анализировались с помощью критерия Краскала-Уоллиса.
2.6.2 Анализ данных по PRRSV
Анализ температуры тела: для статистического анализа температуры тела после заражения использовался метод ковариационного анализа повторных измерений, при этом в качестве ковариаты выступала средняя температура тела до заражения. Анализ среднесуточного прироста массы тела: для статистического анализа среднесуточного прироста массы тела использовался метод ковариационного анализа, при этом в качестве ковариаты выступала масса тела до заражения. Анализ вирусгемии: вирусгемия PRRSV после заражения анализировалась путем расчета площади под кривой. При расчетах титр вируса
2.6.3 Анализ данных по микоплазме пневмонии свиней Оценка легочных поражений: анализ проводился с помощью рангового критерия Уилкоксона. Титр антител: оценка проводилась с помощью методов описательной статистики, результаты представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение.
2.6.4 Анализ данных по внутриклеточным бактериям рода Lawsonia Оценка диареи и среднесуточный прирост массы тела: статистический анализ оценок диареи с 13-го по 21-й день проводился с использованием модели кумулятивного логита [27]; данная модель корректирует корреляцию между повторными измерениями с помощью уравнения обобщённых оценок (GEE), а значение P рассчитывается на основе эмпирической стандартной ошибки. Был рассчитан средний суточный прирост массы тела за этот период (с 13-го по 20-й день); с использованием массы тела на 13-й день в качестве ковариаты было проведено статистическое сравнение методом ковариационного анализа, а различия между группами были дополнительно проанализированы с помощью апостериорного теста Тьюки для парных сравнений.
Данные qPCR: данные qPCR для образцов кала и слизистой оболочки тонких кишок подвергались логарифмическому преобразованию log10 (с предварительным добавлением единицы для исключения нулевых значений), результаты выражались в виде log10 пикограмм ДНК/мкл. Данные представлялись в виде средних значений и 95 %-ных доверительных интервалов; отсутствие пересечения интервалов указывало на статистическую значимость. Одновременно площадь под кривой рассчитывалась с помощью линейного трапециевидного правила в качестве комплексного показателя оценки продолжительности выделения патогена. Статистическая проверка AUC данных qPCR кала, данных qPCR кала на 21-й день и данных qPCR слизистой оболочки подвздошной кишки на 21-й день проводилась с помощью дисперсионного анализа, а межгрупповые сравнения — с помощью апостериорного теста Крука.
Анализ патологической оценки и летальности: поражения тонкой кишки и гистологическая оценка: для статистического анализа общей оценки поражений тонкой кишки по макроскопическим данным и общей гистологической оценки использовалась кумулятивная логит-модель, основанная на критерии отношения правдоподобия. Определённое здесь отношение шансов означает соотношение вероятности того, что оценка поражений в группе вакцинации будет относиться к более низкому уровню, по сравнению с контрольной группой. Анализ летальности: для оценки летальности использовалась обобщённая линейная смешанная модель, построенная для данных с биномиальным распределением, с использованием логит-связующей функции и с учетом групп лечения в качестве фиксированного эффекта.
033 Результаты
3.1 Эффективность защиты при заражении вирусом PCV2
3.2 Защитный эффект при заражении свиней микоплазмой пневмонии
3.3 Защитный эффект при заражении вирусом PRRSV
3.4 Защитный эффект при заражении внутриклеточной Lawsonia (LI)
На 32-й день исследования одна свинья из группы Laws-G3 была подвергнута эвтаназии в связи с появлением прогрессирующих двигательных и неврологических симптомов (достижение критерия гуманного умерщвления). Вскрытие выявило фибринозный полисерозит правого голеностопного сустава, брюшной полости и мозговых оболочек; из голеностопного сустава и мозговых оболочек был выделен Streptococcus suis.
У свиней, вакцинированных комбинированной вакциной (Laws-G1), наблюдался аналогичный иммунный ответ на LI, что и у свиней, вакцинированных отдельно вакциной против Lawsonia ID (рис. 3). По сравнению с невакцинированной контрольной группой, обе группы свиней — Laws-G1 и Laws-G2 — продемонстрировали значительное увеличение среднесуточного прироста массы тела, а также значительное снижение показателей диареи, содержания ДНК LI в кале и слизистой оболочке подвздошной кишки, визуальной оценки поражений подвздошной кишки и гистологической оценки подвздошной кишки (табл. 3).
04 Обсуждение
Недавно разработанная комбинированная вакцина PCV M Hyo ID обеспечивает значительную защиту как от инфекции PCV2, так и от инфекции свиной микоплазмы пневмонии, причем её эффективность сопоставима с результатами, достигаемыми при отдельной внутрикожной вакцинации моновакцинами против PCV2 и свиной микоплазмы пневмонии [21]. Кроме того, данная комбинированная вакцина отлично сочетается с вакциной против Lawsonia ID и может вводиться одновременно с вакциной против PRRS на одной стороне шеи, что позволяет обеспечить комплексную защиту от этих четырёх основных заболеваний свиней за один сеанс. Этот прорыв представляет собой важный шаг вперёд в управлении здоровьем свинопоголовья и обладает множеством преимуществ: экономия времени, снижение затрат на рабочую силу, улучшение благополучия животных за счёт сокращения количества инъекций и процедур, а также уменьшение энергетического следа вакцинации.
Наши предыдущие исследования подтвердили, что внутрикожная вакцинация монокомпонентными вакцинами против PCV2, PRRSV, микоплазмы пневмонии свиней и Lawsonia intracellulare в одной и той же анатомической области является возможной без ущерба для безопасности и эффективности вакцин [21]. С целью дальнейшего повышения удобства для пользователей, сокращения количества инъекций и снижения воздействия вакцин на окружающую среду мы разработали готовую к применению комбинированную вакцину PCV M Hyo ID. Целью данного исследования является оценка эффективности этой новой двухкомпонентной вакцины, а также ее защитного действия против инфекций, вызываемых PCV2, микоплазмой пневмонии свиней, PRRSV и Lawsonia intracellulare при совместном применении с вакцинами против Lawsonia intracellulare и PRRS с использованием устройства для внутрикожной инъекции IDAL® 3G Twin в одной и той же анатомической области, при этом обеспечивая отсутствие негативного влияния на эффективность вакцин.
Испытания на заражение каждым из патогенов показали, что комбинированная вакцинация обеспечивает защитную эффективность, сопоставимую с результатами отдельной вакцинации (или, в случае испытания на заражение микоплазмой пневмонии свиней, с результатами вакцинации против PRRSV). Характеристики безопасности моновакцин и комбинированных вакцин схожи и соответствуют индивидуальным свойствам каждой вакцины (данные не представлены). В испытании с заражением PCV2 в группах комбинированной и отдельной вакцинации наблюдалось значительное снижение вирусгемии и вирусной нагрузки. В испытании с заражением PRRSV по сравнению с контрольной группой в группах комбинированной и отдельной вакцинации отмечалось значительное снижение вирусгемии и значительное повышение среднесуточного прироста массы тела. Отличие от результатов предыдущих исследований [21] заключается в том, что в данном исследовании группа с отдельной вакцинацией продемонстрировала более высокую защитную эффективность по сравнению с группой комбинированной вакцинации в плане подавления вирусной эмиссии (p
Стоит отметить, что в тесте на заражение свиней микоплазмой пневмонии оценка легочных поражений в группе комбинированной вакцинации была значительно ниже, чем в контрольной группе; в испытании с инфицированием внутриклеточным микоплазмой Лоусона как в группе комбинированной вакцинации, так и в группе отдельной вакцинации наблюдалось значительное увеличение среднесуточного прироста массы тела, а также значительное снижение оценки диареи, содержания ДНК LI в кале и слизистой оболочке подвздошной кишки, оценки макроскопических поражений подвздошной кишки и гистологической оценки (табл. 3).
Вакцина против PRRS относится к категории аттенуированных живых вакцин, и известно, что вирус PRRSV обладает иммуносупрессивным действием. В предыдущих исследованиях сообщалось, что инфекция PRRSV или применение аттенуированной живой вакцины против PRRSV снижает эффективность вакцины против микоплазмы пневмонии свиней [28]. Однако, напротив, при использовании вакцин PCV ID, M Hyo ID, Lawsonia ID и вакцины против свиного парвовируса не наблюдалось интерференционного эффекта, вызванного вакцинацией против PRRS [29, 30, 21]. В данном исследовании, за исключением показателей вирусгемии в тесте на заражение PRRSV, между группами, получившими комбинированную вакцинацию, и группами, получившими вакцинацию монокомпонентными вакцинами, не было отмечено значимых различий в клинических симптомах и клинической защите от заражения различными патогенами, что свидетельствует об отсутствии взаимного взаимодействия между вакцинами, а также о том, что одновременная вакцинация не оказала негативного влияния на эффективность.
В условиях интенсивного свиноводства такие рутинные процедуры, как вакцинация, сопряжены с захватом животных и причинением боли, что может оказывать неблагоприятное влияние на иммунный статус и общее состояние здоровья свиней [31, 32, 33]. Уменьшение количества захватов и частоты вакцинационных процедур, а также применение внутрикожного пути введения всех вакцин против основных патогенов позволяют добиться значительного улучшения благополучия животных [33, 34]. Результаты данного исследования показывают, что подкожная вакцинация с использованием безыгольных инъекционных устройств (таких как IDAL® 3G или IDAL® 3G Twin) является простой и быстрой процедурой, сочетающей в себе дополнительные преимущества безыгольной и подкожной вакцинации, что эффективно повышает удобство проведения процедуры и улучшает благополучие животных.
Одно из основных преимуществ данной комбинированной вакцины заключается в том, что она обеспечивает гибкость при разработке более широких программ борьбы с заболеваниями. Данное исследование подтвердило, что вакцину PCV M Hyo ID можно успешно смешивать с вакциной LI и вводить тем же подкожным путем, что обеспечивает дополнительную защиту от другого основного желудочно-кишечного патогена, поражающего свиное стадо. Кроме того, эту подкожную вакцину можно вводить одновременно с вакциной против PRRSV с помощью устройства для двойного подкожного введения. Эта особенность позволяет одновременно предотвратить четыре основных заболевания (PCV2, микоплазмоз свиней, PRRSV и внутриклеточный лаузен) за одну процедуру, что значительно расширяет спектр профилактики, достигаемый за один раз. Такая стратегия не только оптимизирует процесс вакцинации, но и максимально снижает стресс и дискомфорт животных за счет сокращения количества необходимых манипуляций — при этом предыдущие исследования подтвердили связь между многократными манипуляциями и стрессом животных, а также потенциальным влиянием на иммунный ответ.
С экономической и экологической точек зрения применение данной комбинированной вакцины приносит значительные выгоды. Объединение вакцин означает сокращение количества необходимых доз, что снижает производственные потребности и соответствующие затраты на изготовление, упаковку, хранение и транспортировку. Это способствует сокращению энергопотребления и общего углеродного следа, что соответствует концепции устойчивого развития, которой уделяется всё большее внимание в ветеринарии и животноводстве.
С точки зрения практического применения такая схема внутрикожной комбинированной вакцинации обладает значительными преимуществами в условиях свиноводства, где эффективность труда и оптимизация ресурсов имеют решающее значение. Возможность вакцинации от четырёх различных заболеваний за одну операцию эффективно решает операционные проблемы, с которыми сталкиваются свиноводы, — что особенно важно для крупных свиноводческих хозяйств, где наблюдается постоянная нехватка рабочей силы и уделяется особое внимание экономической эффективности. Сокращение времени обработки каждого животного не только повышает производственную эффективность фермы, но и способствует более гуманным методам ведения хозяйства за счет уменьшения стрессовых реакций, вызванных повторяющимися манипуляциями.
Наконец, сам метод внутрикожной вакцинации открывает многообещающие перспективы для производства вакцин для свиней. Исследования подтверждают, что внутрикожная вакцинация обеспечивает мощный иммунный ответ и при этом является малоинвазивной процедурой, что способствует более полному соблюдению стандартов благополучия животных в животноводстве. По сравнению с традиционными внутримышечными инъекциями этот метод вызывает меньший дискомфорт у животных и соответствует ожиданиям потребителей и регулирующих органов в отношении гуманного обращения с сельскохозяйственными животными.
05. Выводы
В рамках данного исследования была успешно разработана новая комбинированная вакцина PCV M Hyo ID против инфекций, вызываемых PCV2 и микоплазмой пневмонии свиней, эффективность которой сопоставима с соответствующими моновакцинами. Данная вакцина отлично сочетается с вакциной против Lawsonia ID и может вводиться одновременно с подкожной вакциной против PRRS на одной стороне шеи, что позволяет обеспечить комплексную защиту от четырёх основных заболеваний свиней за один приём. Данная схема, обеспечивая эффективность вакцины, обладает одновременно экономическими, экологическими и гуманными преимуществами, предлагая более устойчивое и гуманное решение для управления здоровьем свиного стада. Будущие исследования должны быть направлены на изучение возможности объединения четырёх антигенов в одной вакцине, а также на дальнейшее изучение потенциала совместимости с другими вакцинами с целью расширения спектра защиты здоровья свиного стада.
